roman Coronavirus (2019-nCoV) Nucléique kit de détection d'acide (Fluorescent RT-PCR)

【Destiné Utilisez】

Le kit est un TaqMan sonde fluorescente en temps réel PCR pour détecter qualitativement ORF1ab, n gènes nucléiques acide de 2019-nCoV dans l'écouvillon de gorge, les expectorations chez les patients avec des symptômes suspects de pneumonie et des cas en grappes.

Les résultats des tests sont fournis à titre indicatif uniquement et ne peuvent pas être considérée comme la seule référence pour le diagnostic clinique. recommandé de faire une analyse manifeste concernant les symptômes cliniques et autres résultats de laboratoire.

opérateurs devraient avoir une expérience de formation professionnelle en amplification génique ou en essai de méthodes de biologie moléculaire et posséder les qualifications appropriées pour les opérations de laboratoire. Le laboratoire devrait avoir des précautions de sécurité biologique et des procédures de protection

【 principe du test 】

dans ce kit, les amorces et les sondes sont conçues pour les régions conservées et spécifiques de l'ORF1ab, n de 2019-nCoV, respectivement. fluorescent PCR est utilisé pour détecter l'ARN viral après nucléique purification acide de l'échantillon ARN.

Ceci kit de test utilise fluorescent en temps réel PCR technologie.During PCR amplification, la sonde se lie à la matrice et l'extrémité 5 ' le groupe de rapporteurs de la sonde est clivé par le Taq enzyme (5 '→ 3' activité exonucléase), s'éloignant ainsi de le groupe d'extinction pour générer un signal fluorescent. La courbe d'amplification en temps réel est automatiquement tracée en fonction du signal de fluorescence détecté, et la valeur ct de l'échantillon est calculée (Le nombre de cycles subis lorsque le signal de fluorescence dans chaque tube de réaction atteint le seuil fixé). FAM , VIC et rouge texas fluorophores sont utalisés marquer ORF1ab gène, n sondes de gène en réaction solution. en utilisant un test, détection qualitative des deux gènes ci-dessus de 2019-nCoV peut être exécuté simultanément.

À éviter le résultat faux négatif, le kit est pourvu d'un contrôle interne (IC), marqué Cy5 groupe fluorescent qui pourrait être utilisé pour surveiller la procédure d'extraction et la solution de réaction.

【 composants principaux 】

Remarque ¹ : Les différents lots de composants ne peuvent pas être échangé.

Remarque ² : Le kit de test n'est pas contient nucléique réactif d'extraction d'acide, veuillez préparer le réactif avant utilisation.

1. manipulation des échantillons

ajouter 10μL de contrôle interne en 200μL du contrôle positif et du contrôle négatif, respectivement pour effectuer le nucléique acide extraction.

2. réactif préparation:

système préparation: prendre pré-installé Nucléique lyophilisateur d'amplification d'acide, obtenu en ouvrant le sachet en aluminium et en le centrifugeant immédiatement. échantillon de chaque test devrait être les multiples de 8 contenant un contrôle positif et un contrôle négatif contrôle.add 35μL sans nucléase eau sur chaque réaction tube.

3.Échantillon Chargement:

ajouter 5μL échantillon nucléique acide à tester, contrôle positif, contrôle négatif dont le volume de réaction total est de 40 μL dans la réaction allouée solution.for il n'est pas nécessitent un mélange fin, et fermez simplement le couvercle de PCR tube de réaction, centrifuger le liquide dans la paroi du tube sur au fond du tube, traitez ainsi le PCR amplification.

après vérification, on estime que l’ajout de 5μL-10μL huile de paraffine dans le PCR système n'affectera pas le PCR résultat mais éviter la contamination et la vaporisation de liquide.